聚合酶链反应诱导HPV16E7 C端基因突变和突变蛋白在真核细胞表达

• 作者: 刘方 左亚刚 朱铁山 王宝玺 王家璧 闫言 马东来
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 乳头状瘤病毒,人 突变 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 115-117
• 页数: 3页
• 字数: 3101字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2005.02.016

摘要

目的聚合酶链反应(PCR)诱导人乳头瘤病毒(HPV16)早期基因E7 C端锌指结合基序基因突变,评价突变对抗原稳定性的影响.方法采用PCR技术对HPV16E7第58、91位氨基酸进行突变,构建野生型(pcDNA3.1/16E7)和突变型(pcDNA3.1/16ME7)重组体,对其蛋白表达进行比较.结果HPV16E7 C端第58、91位氨基酸突变后真核细胞表达成功,免疫荧光检测在质粒转染COS-7细胞24 h后两种重组体均有阳性细胞出现,但在48 h时突变型重组体阳性细胞消失.免疫印迹技术在24 h和48 h时,突变型重组体均未见阳性条带.结论 HPV16E7 C端锌指结构对维持蛋白稳定性起重要作用,突变后蛋白稳定性下降.