神经特异性转录因子DAT1酵母双杂交诱饵载体的构建

• 作者: 惠玲 王小平 蔡文琴
• 来源期刊: 西北国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经特异性转录因子 酵母双杂交 诱饵质粒
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 244-246
• 页数: 3页
• 分类号: R379
• 字数: 2565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8622.2005.04.002

摘要

目的:用神经特异性转录因子DAT1构建酵母双杂交系统中的诱饵载体.方法:根据GenBank中提供的DAT1序列设计引物,以小鼠脑组织cDNA文库为模板,PCR扩增DAT1,并与pLexA载体连接,测序鉴定.用醋酸锂法转化酵母菌EGY48,在选择性培养基上观察pLexA-DAT1在EGY48中的表达.结果:PCR扩增出的DNA片段约490 bp,大小正确,构建的融合表达载体pLexA-DAT1,测序结果表明序列完全正确,融合区域的读码框正确.转化了pLexA-DAT1的酵母菌EGY48在加有X-Gal的SD/Gal/Raf/-His/-Ura营养缺陷型诱导平板上菌落不变蓝,证明LexA-DAT1融合蛋白本身不具有激活p8op-LacZ报告基因的能力,可以用作进一步的实验.结论:获得了在酵母细胞中正确表达且未自主激活报告基因的融合表达载体pLexA-DAT1,可作为酵母双杂交系统中的"诱饵".

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡文琴	第三军医大学神经生物教研室	188	1499	18.0	27.0
2	惠玲	兰州军区兰州总医院医学科学实验中心	37	96	5.0	7.0
3	王小平	兰州军区兰州总医院医学科学实验中心	1	1	1.0	1.0