低氧启动重组腺相关病毒的构建

• 作者: 孔燕国 张波 李桂林 栗世方 王任直 王欣 窦万臣
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组腺相关病毒 低氧 启动区
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 221-224
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3454字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2005.03.002

摘要

目的构建低氧启动rAAV,介导目的基因仅在低氧时特异性高效表达.方法通过分子生物学的方法,分别构建pGL3-6 HRE-CMV-mp和pGL3-6 HRE-CMV-mp-WPRE载体,比较2种低氧启动子的特异性和在低氧时的启动能力.选择最佳的低氧启动子构建低氧启动rAAV载体.采用磷酸钙和氯仿-PEG8000/NaCl-氯仿法构建低氧启动rAAV病毒.rAAV病毒蛋白电泳和EGFP报告基因验证低氧启动rAAV病毒的构建和介导目的基因在低氧时的表达. 结果HRE-CMV-mp-WPRE是最佳的低氧启动子,在低氧时高效、特异的表达目的基因.低氧启动rAAV仅在低氧时介导报告基因EGFP的表达.采用6 HRE-CMV-mp-WPRE启动子的rAAV具有良好的低氧特异性和高效启动能力.结论采用最佳的低氧启动子,本研究实现了低氧启动rAAV的构建.