应用AdEasy系统构建携带反义多药耐药相关蛋白的重组腺病毒的实验研究

• 作者: 严律南 李德华 胡海洋 苟兴华 赵永恒 陈琳 韩蕾
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 反义RNA技术 多药耐药 多药耐药相关蛋白 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 临床医学研究
• 页码范围: 757-761,765
• 页数: 7页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4467字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2005.11.001

摘要

目的:应用腺病毒载体AdEasy系统构建携带反义多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)的重组腺病毒载体.方法:将MRP基因片段反向克隆到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183体内进行同源重组,经293细胞包装、扩增后得到携带反义MRP的重组腺病毒AdEasy-GFP-ASmrp.结果:成功地构建了携带反义MRP的重组腺病毒载体系统,经测定病毒滴度可达2.5×109efu/ml,感染复数(multiplicity of infection,MOI)为100时对SMMC7721/ADM细胞株转导效率可达90%以上.结论:腺病毒载体AdEasy系统能简便、有效地产生重组腺病毒,且生成的病毒滴度高、转导效率好,为进一步研究肝癌耐药机制及其逆转方式提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严律南	四川大学华西医院普外科	326	1652	17.0	25.0
2	陈琳	南京医科大学第一附属医院普外科	45	188	8.0	11.0
3	李德华	成都地奥制药集团有限公司基因工程药物研究室	24	117	6.0	8.0
4	苟兴华	成都地奥制药集团有限公司基因工程药物研究室	23	119	6.0	8.0
5	韩蕾	成都地奥制药集团有限公司基因工程药物研究室	22	112	6.0	8.0
6	赵永恒	四川大学华西医院普外科	11	71	6.0	8.0