酵母双杂交技术筛选白细胞cDNA文库中新基因NS2TP蛋白结合蛋白基因

• 作者: 张黎颖 成军 王巧侠 邓红 郭江 郭风劲
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病型肝炎病毒 酵母双杂交 NS2TP蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（14）
• 所属期刊栏目: 病毒性肝炎
• 页码范围: 1688-1691
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3889字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2005.14.010

摘要

目的:筛选HCV非结构蛋白2(NS2)反式调节蛋白(NS2TP)的结合蛋白,探讨HCV的致病机制及新蛋白NS2TP的生物学功能.方法:应用酵母双杂交系统3,将PCR法扩增的NS2TP基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化单倍体酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人白细胞文库质粒pACT2的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-αZ-半乳糖(X-α-gal)上进行双重筛选,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠杆菌氨苄青霉素-LB平板上选择并测序,结果在GenBank中进行生物信息学分析.结果:筛选出与NS2Tp结合的蛋白基因25个,其中包括细胞色素p450 2E1、核心蛋白聚糖、p68、β2微球蛋白、羧肽酶N2等已知功能基因及3个未知功能序列.结论:为阐明新蛋白NS2TP的分子生物学功能及HCV的致病机制提供了新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
2	张黎颖	北京地坛医院传染病研究所	34	100	5.0	8.0
3	邓红	西安交通大学第二医院感染科	30	158	7.0	11.0
4	郭江	北京地坛医院传染病研究所	32	103	7.0	8.0
5	王巧侠	北京地坛医院传染病研究所	4	18	3.0	4.0
6	郭风劲	北京地坛医院传染病研究所	3	10	2.0	3.0