人低氧诱导因子1α腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 吴平生 王月刚 郭寿贵
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 低氧诱导因子1α 腺病毒 基因治疗
• 年，卷（期）: 2005,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2581-2584
• 页数: 4页
• 分类号: R784
• 字数: 3068字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2005.17.007

摘要

目的构建人HIF1α腺病毒表达载体,研究人低氧诱导因子1α基因对冠心病的血管新生作用.方法采用分子克隆技术,从pcDNA3.1/V5-HisA-HIF1α质粒获得HIF1α cDNA,经pcDNA3.1(+)克隆到穿梭质粒pShuttle2,以PI-Sce I和I-Ceu I双酶切重组穿梭质粒,含有HIF1 α cDNA的表达盒通过体外连接法与线性化的腺病毒骨架质粒Adeno-X Viral DNA连接,重组成pAdeno-HIF1α腺病毒质粒,经酶切及测序鉴定正确后,在HEK293细胞中包装成为重组Adeno-HIF1α腺病毒,并进行PCR鉴定及滴度测定.结果经酶切鉴定及基因测序证实重组腺病毒质粒构建成功,包装后冻融细胞的上清PCR检测重组腺病毒包装成功,病毒滴度为2×10pfu/mL.结论成功构建重组腺病毒Adeno-HIF1 α,为冠心病的基因治疗研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴平生	南方医科大学南方医院心内科	131	614	13.0	18.0
2	郭寿贵	南方医科大学南方医院心内科	7	23	3.0	4.0
3	王月刚	南方医科大学南方医院心内科	48	237	8.0	12.0