表达犬细小病毒VP2蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定

• 作者: 夏咸柱 扈荣良 杨松涛 谢之景 邹啸环 黄耕
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 犬细小病毒 VP2基因 犬腺病毒
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 214-219
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4486字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2006.03.011

摘要

对CAV-2的E3区的Ssp Ⅰ片段进行缺失构建了E3区缺失载体pVAX△E3,然后将CPV VP2表达盒连接到pVAX△E3的E3区缺失处,构建了CPV VP2表达盒的转移载体p△ECPV-VP2,用Sal Ⅰ+Nru Ⅰ分别对pPoly2-CAV2和p△ECPV-VP2进行双酶切,分别进行琼脂糖凝胶电泳回收目的片段,将含CPV VP2表达盒的Sal Ⅰ+NruⅠ片段定向克隆入pPoly2-CAV-2载体,获得了含CPV VP2表达盒重组CAV-2基因组的质粒pCAV-2/CPV-VP2.用Asc Ⅰ+Cla Ⅰ对pCAV-2/CPV-VP2进行双酶切,释放CAV-2/CPV-VP2重组基因组,将CAV-2/CPV-VP2基因组与去除Sal Ⅰ+Nru Ⅰ片段的CAV-2基因组的两个片段混合,利用脂质体介导共转染DK细胞,出现病变,获得重组病毒CAV-2/CPV.并且,从形态学、基因组水平、目的基因的转录及重组病毒的生长特征等方面进行了鉴定.结果证明,CAV-2/CPV具有典型的CAV-2形态特征,CAV-2/CPV在繁殖的过程中没有对CPV VP2表达盒片段进行缺失或重排,并且能够转录CPV VP2的mRNA.CAV-2/CPV的繁殖速度比野生型CAV-2的繁殖速度慢.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	扈荣良	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	49	456	13.0	19.0
2	谢之景	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	37	245	8.0	14.0
4	夏咸柱	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	59	634	15.0	23.0
7	杨松涛	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	22	111	6.0	10.0
8	邹啸环	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	19	241	7.0	15.0
9	黄耕	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	22	267	9.0	16.0