利用同源重组构建人脑的酵母双杂交cDNA文库

• 作者: 刘立 吕立夏 徐磊 李学礼 李静琪
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: SMART技术 同源重组 酵母双杂交 人脑cDNA文库
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 36-39
• 页数: 4页
• 分类号: Q52
• 字数: 2532字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0392.2006.04.010

摘要

目的 利用SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术,通过同源重组的方法,在酵母菌株Y187中构建人脑全长cDNA文库.方法 利用SMART技术,以人脑总RNA为模板,反转录合成cDNA第一链.再在DNA聚合酶下,通过长距离PCR,扩增双链cDNA.同时构建pGADT7-Rec质粒载体.纯化的ds cDNA与线性化pGADT7-Rec质粒载体共同转化酵母菌株感受态Y187,经胞内同源重组形成环状文库质粒.应用营养缺陷的方法在SD/-Leu平板上筛选并收集所有克隆从而获得酵母双杂交的人脑cDNA文库.结果 所获得的文库容量为1.2×106,重组子不同插入片断大小在0.3～2 kb之间.结论 在酵母菌株Y187成功构建了用于酵母双杂交的人脑cDNA文库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕立夏	同济大学基础医学院生化教研室	86	277	9.0	13.0
2	徐磊	同济大学基础医学院生化教研室	74	458	10.0	19.0
3	李学礼	同济大学基础医学院生化教研室	37	147	6.0	10.0
4	李静琪	同济大学基础医学院生化教研室	7	13	3.0	3.0
5	刘立	同济大学基础医学院生化教研室	3	5	1.0	2.0