转化生长因子-β1 shRNA真核表达载体的构建

• 作者: 吴军正 朱秀丽 温德升 王静 郭富平
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 短发夹状RNA 真核表达载体 转化生长因子-β1
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 113-116
• 页数: 4页
• 分类号: R739.87
• 字数: 3292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2006.02.005

摘要

目的构建转化生长因子β1(TGF-β1)的短发夹状RNA(shRNA)表达系统,为人涎腺粘液表皮样癌的治疗提供新的方法.方法根据Genebank提供的TGF-β1mRNA序列,设计短链寡核苷酸,化学合成后经退火形成双链DNA片段,克隆到pWH1载体中,用酶切方法对重组体进行鉴定;最后将构建的TGF-β1特异性shRNA表达载体转染涎腺粘液表皮样癌细胞,通过RT-PCR、免疫组化观察其对细胞TGF-β1 mRNA和蛋白水平表达的影响.结果经酶切、连接后构建的质粒称之为pWH1-TGF-β1.酶切证实成功构建了TGF-β1 shRNA表达载体,RT-PCR和免疫组化结果显示其能够在mRNA和蛋白水平抑制细胞内TGF-β1的表达.结论成功构建的TGF-β1特异性shRNA表达载体具有阻断TGF-β1表达的功能,可能为涎腺粘液表皮样癌治疗提供有效的方法和手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温德升	第四军医大学口腔医学院生物教研室	14	89	5.0	8.0
2	吴军正	第四军医大学口腔医学院生物教研室	77	429	12.0	16.0
3	王静	第四军医大学口腔医学院生物教研室	51	262	10.0	13.0
4	朱秀丽	第四军医大学口腔医学院生物教研室	9	99	4.0	9.0
5	郭富平	第四军医大学口腔医学院生物教研室	4	15	3.0	3.0