hTERT核心启动子驱动的条件复制型腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 倪芳 汪思应 王立生 瞿成奎 胡泽斌 鲁茁壮
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 末端转移酶/遗传学 腺病毒科 发光蛋白质类/遗传学
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: R345.9|R373.1|R341
• 字数: 2853字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2006.01.007

摘要

目的构建并鉴定一种新型人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动的条件复制型腺病毒载体.方法采用PCR的方法克隆腺病毒E1区基因(E1A, E1B55K)、E1B的启动子(E1Bp)以及人端粒酶逆转录酶亚基启动子(hTERTp),以及2个目的基因:人GM-CSF和GFP(Green Fluorescence Protein, GFP).采用一系列分子生物学方法构建pShuttle-GFPSV55K穿梭质粒,应用此穿梭质粒与AdEasy-1腺病毒DNA在BJ5183细菌内重组得到重组腺病毒质粒,将其转染293细胞获得Ad-GFPSV55K重组腺病毒.PCR法鉴定重组腺病毒,噬斑形成实验测病毒滴度.结果经过酶切鉴定成功地构建了分别携带GM-CSF基因和GFP报告基因的腺病毒载体,病毒滴度为7×1010 pfu/ml.结论成功获得由hTERT启动子驱动的条件复制型腺病毒载体,为肿瘤的基因治疗打下良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王立生	军事医学科学院放射医学研究所	76	410	10.0	16.0
2	汪思应	安徽医科大学病理生理学教研室	131	558	11.0	15.0
3	鲁茁壮	军事医学科学院放射医学研究所	19	167	7.0	12.0
4	倪芳	安徽医科大学病理生理学教研室	16	66	5.0	7.0
5	胡泽斌	军事医学科学院放射医学研究所	3	7	1.0	2.0
6	瞿成奎	安徽医科大学病理生理学教研室	5	34	4.0	5.0