受人E2F1启动子调控的条件复制型腺病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 张巨峰 李惠明 王慧萍 韦芳
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 条件复制型腺病毒 载体构建 E2F1启动子
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 945-949
• 分类号: Q78
• 字数: 4165字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1007-6611.2011.12.002

摘要

目的 构建并鉴定受人E2F1基因启动子调控的条件复制型腺病毒载体.方法 以人胚肾293细胞的基因组DNA为模板,PCR扩增E2F1基因启动子调控序列,构建表达质粒pE2F1 p-EGFP;PCR扩增腺病毒早期基因E1A,构建表达质粒pTERT p-E1A;将重组质粒pTERT p-E1A酶切得到的E1A基因,插入线性化的pE2F1 p-EGFP,构建pE2F1 p-E1A;酶切重组质粒pE2F1 p-E1A产生受E2F1基因启动子调控E1A的完整表达框,插入质粒pDC311中,构建腺病毒包装穿梭质粒pDC311-E2F1 p-E1A,与腺病毒骨架质粒pBHGlox△1,3Cre共转染人胚肾293细胞,得到条件复制型腺病毒Ad-E2F1 p-E1A;扩增病毒并分别感染E2F1活性增强的系列肿瘤细胞株,利用病毒空斑形成实验检测重组条件复制型病毒的条件复制能力.结果 限制性内切酶鉴定显示重组质粒构建成功,受人E2F1基因启动子调控的溶瘤腺病毒载体仅在E2F1活性增强的肿瘤细胞株中实现条件性复制.结论 构建的新型条件复制型腺病毒载体具有良好的选择性复制能力,在E2F1活性增强的肿瘤治疗方面有良好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦芳	上海交通大学附属第一人民医院实验中心	23	91	5.0	9.0
2	李惠明	上海交通大学附属第一人民医院实验中心	21	50	4.0	6.0
3	王慧萍	上海交通大学附属第一人民医院实验中心	18	25	3.0	4.0
4	张巨峰	上海交通大学附属第一人民医院中心实验室	7	5	2.0	2.0