毛冠鹿睾丸组织cDNA文库的构建及P1精蛋白基因的克隆

• 作者: 庞宏 张文 张锡然 徐春茂 戴君勇 曹祥荣 汤文文 王强 胡均
• 来源期刊: 兽类学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 毛冠鹿 睾丸 cDNA文库 P1精蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 164-170
• 页数: 7页
• 分类号: Q95
• 字数: 5307字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1050.2006.02.009

摘要

为构建毛冠鹿睾丸组织cDNA文库,用TRIzol试剂提取总RNA,利用SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术合成cDNA第1链,双链cDNA经LD-PCR(Long-distance PCR)扩增并经sfiⅠ酶切和过柱分级分离后,克隆入经sfi Ⅰ酶切的λTripiEX2载体,经体外包装而成cDNA原始文库.该毛冠鹿睾丸组织cDNA原始文库含有独立克隆数为5.52×105,重组率达90.8%.文库扩增后,滴度达1.05×109 pfu/ml,插入cDNA平均长度为1.01kb.通过随机挑取噬菌斑,并克隆测序,从该文库中克隆了毛冠鹿睾丸组织特异表达基因:P1精蛋白基因(GenBank序列号:DQ299383),该cDNA具有5'和3'非编码区,从第95至250个核苷酸为一完整阅读框(ORF),此阅读框编码一个51 Aa的P1精蛋白.以上结果表明本文构建的毛冠鹿睾丸组织cD-NA文库符合建库要求,可作为进一步克隆毛冠鹿睾丸组织特异表达基因的可靠材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张锡然	南京师范大学生命科学学院	90	576	11.0	21.0
2	曹祥荣	南京师范大学生命科学学院	65	388	11.0	17.0
3	张文	南京师范大学生命科学学院	10	26	3.0	5.0
4	胡均		3	14	3.0	3.0
5	戴君勇	南京师范大学生命科学学院	8	40	4.0	6.0
6	汤文文	南京师范大学生命科学学院	2	7	2.0	2.0
7	庞宏	南京师范大学生命科学学院	3	10	3.0	3.0