PAP基因cDNA克隆及烟草转基因研究

• 作者: 刘海礁 崔红 曹俊剑 王燕萍
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草 商陆抗病毒蛋白(PAP) cDNA克隆 基因转导 烟草花叶病
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 作物科学
• 页码范围: 130-132,141
• 页数: 4页
• 分类号: S572
• 字数: 2481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2340.2006.02.005

摘要

以美洲商陆(Phytolacca americana L.)为材料,利用RT-PCR方法克隆商陆抗病毒蛋白(PAP)的cDNA,并构建双元植物表达载体PBinARpap.用捕获该质粒的根癌农杆菌菌株LBA4404与烟草叶片外植体共培养,并在附加30 mg·L-1Kan的MS+0.1 mg·L-1IAA+1.5 mg·L-1BA的培养基上诱导植株分化,再生芽在附加30 mg·L-1Kan的MS培养基上生根,实现再生植株.Kan阳性植株经PCR-Sourthern检测筛选,得到PCR阳性植株,证明异源PAP基因在烟草基因组中的整合;经过RT-PCR检测,证明PAP基因在RNA转录水平上有表达;攻毒试验表明,转基因烟草植株对供试病毒TMV具有明显抗性.