幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的表达及免疫原性

• 作者: 孙波 屠振兴 李兆申 杜奕奇 杨骅 许国铭 许涛
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: 螺杆菌,幽门 中性粒细胞激活蛋白 疫苗
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 75-77
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9934.2006.02.002

摘要

目的克隆幽门螺杆菌(Hp)中性粒细胞激活蛋白(NAP)基因并制备其原核表达系统,研究其表达蛋白的免疫原性,为Hp疫苗研制提供理论依据.方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增Hp-NAP基因,测序并作同源性分析后,亚克隆入原核表达载体pET-22b,转化表达菌BL21-CodonPlus(r)(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,Western blot鉴定其免疫原性.结果PCR扩增一408 bp产物,与基因库中相关序列具有高度同源性(＞98%).重组质粒pET-22b-nap转化BL21-CodonPlus(r)(DE3)后表达一相对分子质量约19 000的融合蛋白,能与Hp全菌抗体产生结合反应,Western blot显示特异的单一条带.结论成功构建Hp-NAP原核表达系统,所表达NAP融合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,可作为Hp疫苗的候选抗原.