羊痘病毒实时荧光定量TaqMan PCR检测方法的建立

• 作者: 周晓黎 尹尚莲 康文玉 徐自忠 杨云庆 花群义 董俊 高洪
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 羊痘病毒 荧光定量TaqMan PCR 检测
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 529-533
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1|Q503
• 字数: 4762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.07.004

摘要

参照羊痘病毒(CaPV)P32的基因序列,设计合成了2套引物和1条探针,建立了实时荧光定量PCR技术,对细胞培养物、皮肤丘疹、痂皮等组织病料中的GPV进行了特异性检测和敏感性试验.结果显示,用300nmol/L引物浓度和200nmol/L探针浓度,获得的CT值较小,而△Rn最大;可检测到相当于0.1 TCID50的病毒DNA;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽,相关系数为0.999 5以上;组内和组间试验重复性的变异系数分别为2.3%和3.4%;与常规的PCR相比较,该方法具有快速、特异、敏感、可定量,可同时检测大量样品等优点.表明,荧光TaqMan PCR是一种检测CaPV的良好方法,可对组织病料中低含量的CaPV或持续带毒宿主进行准确检测.