截短的泡球蚴Em18基因原核表达质粒的构建、表达及鉴定

• 作者: 卢晓梅 张彤 张春桃 张琰 张静萍 林仁勇 温浩 王俊芳 王俨 王星
• 来源期刊: 新疆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 泡球蚴 Em18基因 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 283-285,288
• 页数: 4页
• 分类号: R383.33|R34
• 字数: 3917字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5551.2006.04.001

摘要

目的:构建截短的泡球蚴18(Em18)基因的原核表达质粒,获得高效表达、有生物活性的重组蛋白,并对其进行初步鉴定.方法: DNAman软件设计引物,PCR法扩增并构建截短的pET41a-Em18.1原核表达质粒,测序鉴定插入序列正确性.异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导、表达和纯化rEm18.1-GST重组蛋白,采用SDS-PAGE电泳及Western 免疫印迹法对其进行初步鉴定.结果:成功构建出截短的pET41a-Em18.1,SDS-PAGE检测表明rEm18.1-GST重组蛋白得到成功表达,在相对分子量为41 kDa处有表达条带.Western blot结果显示rEm18.1-GST重组蛋白能被AE病人阳性血清识别.结论:截短的pET41a-Em18.1原核表达质粒表达的rEm18.1-GST重组蛋白具有良好的抗原性,为Em18抗原表位的分析奠定基础.