重组质粒pIRES2-EGFP/CCK的构建及其在仓鼠体内及COS-7细胞中的表达

• 作者: 吕毅 王浩华 白纪刚
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胆囊收缩素 骨骼肌 细胞转染 绿色荧光蛋白 COS-7细胞
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-7347.2006.01.001

摘要

目的:构建猪源性CCK基因重组真核表达质粒pIRES2-EGFP/CCK(CCK pDNA),研究其在哺乳动物细胞和仓鼠体内的表达.方法:以限制性内切酶法从中介载体pMD18-T/CCK中切取目的片段CCK,将其克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP中,以脂质体法转染COS-7细胞,同时采用直接肌肉注射法免疫仓鼠,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达.结果:用CCK pDNA转染COS-7细胞后24, 48, 72 h均可检测到绿色荧光蛋白的表达,其中72 h组荧光强度达到最强.用CCK pDNA免疫仓鼠后,第4天注射部位可检测到绿色荧光蛋白的表达,第14天荧光强度明显增强,第42天荧光强度进一步增强,正常对照组始终未检测到绿色荧光蛋白的表达.结论:成功构建了猪源性CCK基因真核表达质粒pIRES2-EGFP/CCK,并成功地在哺乳动物细胞和仓鼠体内进行了表达,为仓鼠胰腺癌的交叉免疫治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕毅	西安交通大学第一医院普通外科	298	1204	15.0	23.0
2	白纪刚	西安交通大学第一医院普通外科	28	134	8.0	10.0
3	王浩华	西安交通大学第一医院普通外科	16	41	4.0	6.0