pIRES2-EGFP/Cbfal真核双表达载体的构建及鉴定

• 作者: 尚永军 李东 陈雄
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 成骨细胞 核心结合因子 pIRES2-EGFP 基因治疗
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 704-706
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3715字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2008.05.005

摘要

目的:构建成骨细胞特异性转录因子Cbfal双表达载体,以期用于成骨的体内、外研究.方法:以含有全长cDNA的pCMV/Cbfal为模板,PCR扩增Cbfal,T-A克隆,酶切亚克隆到pIRES2-EGFP载体上,酶切、PCR及测序鉴定正确后命名为pIRES2-EGFP,脂质体转染NIH3T3细胞,G418筛选稳定表达后,提取细胞的总蛋白,Western blot检测Cbfal蛋白的表达,以未转染组为对照.结果:酶切、PCR及测序证实pIRES2-EGFP/Cbhl载体序列正确,脂质体法转染NIH3T3细胞后可见绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测到Cbfal在蛋白水平的表达.结论:pIRES2-EGFP/Cbfal栽体构建成功,可为后续研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尚永军	赤峰学院附属医院骨科	10	9	2.0	3.0
2	陈雄	内蒙古巴彦淖尔市医院骨科	3	2	1.0	1.0
3	李东		2	1	1.0	1.0