CHO细胞高效表达载体的优化

• 作者: 俞炜源 刘志刚 刘珊 张国强
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: CHEF1-α基因 CHO/dhfr-细胞 基因表达 组织型纤溶酶原激活物
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 301-305
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4909字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.04.001

摘要

目的:研究分析中国仓鼠EF1-α基因的转录调控序列,以构建新型高效表达载体.方法:利用常规分子生物学技术,构建了一系列基于CHEF1-α基因的非翻译区调控序列元件的新型真核表达载体.以组织型纤溶酶原激活剂突变体(k2tPA)作为报告基因,利用本室已建立的CHO-dhfr--Z+定点整合表达系统比较载体表达外源基因的能力,挑选表达量高的载体.进一步添加翻译增强子(H213及V163)序列,再进行评价.结果:CHEF1-α5'UTR及启动子+3'UTR 1.65 kb、CHEF1-α5'UTR及启动子+3'UTR 2.7 kb这2种组合均可有效提高目的基因tPA的表达,表达效率与对照载体相比分别提高了65.9%和54.5%.在添加翻译增强子V163后,载体pMCEdEF53Ⅲ-163frt-k2tPA的表达效率为对照载体的2.65倍.结论:该载体系统在重组蛋白药物的研发方面具有良好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	俞炜源	军事医学科学院生物工程研究所	87	518	11.0	17.0
2	刘志刚	军事医学科学院生物工程研究所	21	138	7.0	10.0
3	张国强	军事医学科学院生物工程研究所	4	29	2.0	4.0
4	刘珊	军事医学科学院生物工程研究所	5	25	3.0	5.0