人sBCMA cDNA的克隆、高可溶性融合表达及活性分析

• 作者: 叶记林 张双全 曹鹏 管政兵
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 医学
• 关键词: RT-PCR sBCMA 融合表达 增殖抑制
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 46-51
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 5291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.01.007

摘要

BCMA是除TACI外BAFF和APRIL共用的另一细胞表面受体.为了研究sBCMA作为拮抗受体的可能及获得活性sBCMA蛋白用做结构功能研究,我们以RT-PCR法从人B系非洲淋巴瘤细胞株Raji总RNA中扩增出人BCMA的全长cDNA,经克隆测序证实所克隆的基因为人BCMA.继而通过嵌套PCR扩增出胞外可溶区(sBCMA,46个氨基酸组成,含有一个6个半胱氨酸的保守CRD,构成3个二硫键)cDNA,构建原核表达载体pET43.1a(+)-sBCMA,在大肠杆菌菌株Origami B(DE3)pLysS中高可溶性融合表达出重组蛋白sBCMA-NusA-Hi%,同时克隆表达了融合蛋白NusA-Hi%.经Ni+-NTA亲和纯化后的目的蛋白进行细胞学实验表明sBCMA能特异阻断BAFF促小鼠B细胞的增殖作用,而NusA-His6则不能,证实我们所表达得到的受体胞外可溶性片段sBCMA与配体具有较高的结合活性.sBCMA融合蛋白的成功表达将为二硫键富含类蛋白的表达提供参考,并为研究其临床应用以及BAFF和APRIL受体结构和功能的关系奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张双全	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	75	1091	20.0	30.0
2	曹鹏	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	6	25	3.0	5.0
3	管政兵	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	2	5	1.0	2.0
4	叶记林	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	3	63	3.0	3.0