茶树巯基蛋白酶抑制剂基因cDNA在大肠杆菌中的表达

• 作者: 余有本 房婉平 江昌俊 王朝霞
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 茶树巯基蛋白酶抑制剂 大肠杆菌 高效表达 活性测定
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 608-612
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4767字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2006.06.012

摘要

通过RT-PCR法扩增出茶树中巯基蛋白酶抑制剂基因(Tea cystatin,TC)cDNA编码区序列,定向克隆到表达载体pET 32a(+)上,得到重组质粒pET-TC,在表达宿主菌BL21trxB(DE3)中高效表达,产生分子量约为31.8 kDa的特异融合蛋白.实验表明:随着诱导时间的延长,表达的融合蛋白Trx-TC的产量逐渐增加,特异蛋白的表达量最高可占菌体总蛋白的35.4%;在15℃、25℃、30℃和37℃四个不同诱导温度下,均能诱导产生融合蛋白;IPTG终浓度在0.5 mmol/L～5 mmol/L范围内均能诱导产生融合蛋白,表达的产物主要以可溶性蛋白形式存在.另外,体外酶促反应表明表达的融合蛋白Trx-TC对木瓜蛋白酶有明显的抑制活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江昌俊	安徽农业大学生物技术中心	104	1931	22.0	40.0