传染性法氏囊病病毒非结构蛋白VP5的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 冉多良 张宁 李俊山 王笑梅 高宏雷 高玉龙
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 传染性法氏囊病病毒 非结构蛋白 VP5 克隆表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 30-35
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4284字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2006.10.006

摘要

利用PCR技术,从传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx、Gt毒株中分别扩增出VP5基因,将其克隆到表达载体pET30a、pET28a中.经PCR、酶切和序列分析鉴定获得重组质粒命名为pET28a-GtVP5、pET30a-GxVP5.将pET30a-GxVP5、pET28a-GtVP5分别转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功表达了约24 kDa的Gx-VP5及23kDa的Gt-VP5融合蛋白,它们都以包涵体形式存在.将Gx-VP5纯化后的蛋白免疫8周龄BALB/c雌鼠,ELISA分析表明制备的抗血清效价在1∶25600以上,Western blot分析VP5表达产物能与抗6×His mAb及抗IBDV多克隆抗血清发生反应,具有良好的免疫反应特异性.