甘油脱水酶再激活酶的克隆表达及活性鉴定

• 作者: 刘桂兰 方柏山 李雯君 林锦霞 洪燕 王晓霞
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甘油脱水酶 甘油脱水酶再激活酶 共表达 不相容双质粒 分子伴侣
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 950-955
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 3883字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.06.014

摘要

运用PCR技术从克雷伯氏菌的基因组中分别扩增得到了编码甘油脱水酶再激活酶α、β两个亚基的基因gdrA、gdrB.将gdrA、gdrB克隆至pMD-18T载体上,构建克隆载体pMD-gdrAB.经测序正确后,将gdrAB亚克隆至表达载体pET-28a(+)上构建表达质粒pET-28gdrAB.利用双抗生素筛选法,将pET-28gdrAB与连有甘油脱水酶基因的表达载体pET-32gldABC在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中共表达,鉴定了甘油脱水酶再激活酶的活性.