大肠杆菌trpBA基因的克隆表达

• 作者: 刘云 张绪梅 徐琪寿 杨继军 郭长江 韦京豫
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 色氨酸合成酶 trpBA基因 克隆 表达 酶活性
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 12-14
• 页数: 3页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 2637字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.01.004

摘要

目的:提高大肠杆菌中色氨酸合成酶的表达量和表达活性.方法:利用PCR方法从大肠杆菌K-12的基因组中直接克隆出紧密连锁trpB和trpA基因(简称trpBA),并将其连接到原核表达载体pet22b(+)中,得到重组质粒pet22b(+)-trp-BA,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE分析并用比色法测定其活性.结果:凝胶电泳可见PCR扩增产物大小约为2kb,SDS-PAGE鉴定目的蛋白的Mr分别约为29 000和44 000,色氨酸合成酶α、β亚基分别得到了高效表达,色氨酸合成酶活性提高到对照菌的3.7倍.结论:成功构建了重组质粒pet22b(+)-trpBA,色氨酸合成酶的表达量和表达活性在大肠杆菌中得到了提高,为高产色氨酸基因工程菌的构建奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭长江	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	128	1408	19.0	32.0
2	徐琪寿	军事医学科学院放射医学研究所	61	580	13.0	22.0
3	张绪梅	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	7	181	5.0	7.0
4	韦京豫	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	72	748	16.0	25.0
5	杨继军	军事医学科学院卫生学环境医学研究所	48	699	15.0	25.0
6	刘云	军事医学科学院放射医学研究所	20	153	7.0	11.0