人细胞周期蛋白D1在大肠杆菌BL21中的表达及纯化

• 作者: 周立宏 曹玉华 李桂英 邹德生
• 来源期刊: 吉林大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人细胞周期蛋白D1 表达 包涵体 融合蛋白 蛋白质纯化 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 839-843
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3584字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-5489.2006.05.036

摘要

将人细胞周期蛋白D1全长cDNA克隆入原核表达载体pET-28c(+)中,经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3)后获得表达菌株.该菌株经IPTG诱导高效表达出带有组氨酸标签的以包涵体形式存在的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的23%.包涵体经洗涤和溶解,在变性条件下利用Ni2+螯合柱纯化、尿素梯度复性后,得到纯度达98%以上的纯化蛋白.SDS-PAGE显示纯化蛋白的分子量约为43 000,Western-blot分析表明,在相应分子量处有一特异性条带,说明成功表达和纯化重组人细胞周期蛋白D1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李桂英	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	29	101	5.0	8.0
2	邹德生	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	2	7	2.0	2.0
3	周立宏	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	4	10	3.0	3.0
4	曹玉华	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	4	8	2.0	2.0