小鼠野生型和截短型睫状神经营养因子基因的克隆及真核表达

• 作者: 左爱军 李宁东 梁东春 袁松涛 赵堪兴
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 睫状神经营养因子 基因克隆 真核表达载体 视网膜色素变性 鼠
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 241-244
• 页数: 4页
• 分类号: R774.13
• 字数: 4130字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2006.04.001

摘要

目的构建野生型和截短型小鼠睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)基因的真核表达载体,并在ARPE-19细胞系表达目的蛋白.方法通过逆转录聚和酶链反应(RT-PCR)扩增小鼠CNTF野生型全长编码序列,体外定点突变获取截短型CNTF的互补DNA编码序列,将上述两序列分别克隆至pTracer-CMV真核表达载体,转染ARPE-19细胞,免疫印迹检测2种CNTF的表达.结果PCR成功扩增了野生型和截短型CNTF基因,DNA序列分析证实2种真核表达载体中的CNTF序列与Gene Bank中目的序列一致.2种重组真核表达质粒转染ARPE-19细胞后,免疫印迹证实CNTF在ARPE-19细胞培养上清中有表达.结论野生型和截短型CNTF基因在ARPE-19细胞系的真核表达为视网膜色素变性基因治疗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵堪兴		74	923	14.0	28.0
2	李宁东		19	78	4.0	8.0
3	梁东春		14	64	4.0	7.0
4	袁松涛		6	1	1.0	1.0
5	左爱军		10	46	4.0	6.0