超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素基因B的原核表达

• 作者: 余模松 张庶民 杨晓明 王丽婵
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌肠毒素B 超抗原 基因克隆 原核表达 PCR免疫印迹
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 418-421
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 3951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2006.05.008

摘要

目的构建重组pET-30a-SEB原核表达载体,转化感受态大肠杆菌BL-21(DE3),诱导表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB).方法利用PCR技术从产SEB的金黄色葡萄球菌标准菌株CMCC-26075基因组DNA中克隆SEB全长序列,将其克隆到pGEM-T Easy载体中并进行测序.构建pET-30a-SEB原核表达质粒,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代β-D半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,经镍离子螯合亲和层析纯化后免疫鉴定.结果PCR获得超抗原SEB基因片段,与克隆载体连接后经测序与文献报道的基本一致;成功构建了pET-30a-SEB原核表达质粒且成功诱导表达出相对分子质量(Mr)约31×103的蛋白.结论成功克隆了seb基因序列,并进行了原核表达和签定,获得了SEB蛋白,为后续对超抗原SEB的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨晓明		32	129	6.0	8.0
2	余模松		26	92	5.0	7.0