大肠杆菌BL21(DE3)lpxM突变株的构建

• 作者: 刘志敏 张君 方宏清 谢达平 陈惠鹏
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌BL21(DE3) lpxM基因 Red同源重组系统
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 489-492
• 页数: 4页
• 分类号: Q75|Q78
• 字数: 4601字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.04.002

摘要

目的:lpxM基因失活可以产生极低内毒素活性的脂多糖.构建大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株,并考察该突变株的生长状态和表达重组蛋白的能力.方法:构建同源臂长500 bp左右的打靶载体,借助Red同源重组系统,使E.coli BL21(DE3)的lpxM基因发生插入失活,再导入编码FLP位点特异性重组酶的质粒pCP20去除抗性基因.PCR鉴定发生插入突变的菌株,应用SDS-PAGE分析突变前后的脂多糖,考查对重组蛋白表达的影响.结果:PCR鉴定结果说明lpxM基因发生了插入突变.与出发株比较,突变株的脂多糖电泳图谱发生了明显变化,但其生长状态与表达重组蛋白的能力与出发株基本一致.结论:大肠杆菌BL21(DE3)的lpxM突变株可以用于重组蛋白的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方宏清	军事医学科学院生物工程研究所	42	245	8.0	13.0
2	陈惠鹏	军事医学科学院生物工程研究所	143	885	15.0	23.0
3	谢达平	湖南农业大学理学院	89	1482	19.0	35.0
4	刘志敏	军事医学科学院生物工程研究所	55	823	12.0	28.0
5	张君	军事医学科学院生物工程研究所	2	5	2.0	2.0