人GST-OPGL 融合蛋白的原核表达与抗体制备

• 作者: 刘继中 张勇 杨彤涛 杨辉 范清宇 陈苏民 马保安 高杰
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: @骨保护素配体 基因融合 基因表达 大肠杆菌/免疫学 遗传载体
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 论著·临床研究
• 页码范围: 1439-1442
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 字数: 2736字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2006.11.015

摘要

目的:克隆人骨保护素配体(OPGL)编码区基因,构建融合表达载体,在大肠杆菌中表达,并制备抗体.方法:采用RT-PCR法得到人骨保护素配体(OPGL)编码区cDNA,克隆入原核表达载体pGEX-4T-3,转化大肠杆菌感受态细胞JM109,0.1mM β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后收集菌体蛋白,行SDS-PAGE电泳.将此融合蛋白免疫新西兰兔,Western blot鉴定. 结果:获得人骨保护素配体编码区cDNA,构建原核表达载体pGEX-OPGL,转化菌株可表达人GST-OPGL蛋白,蛋白分子量约为43KD,蛋白表达量约为菌体总蛋白的21%.Western blot 检测表明获得了免疫活性强的兔抗人的多克隆抗体.结论:获得人骨保护素配体编码区cDNA,在大肠杆菌中表达了人GST-OPGL融合蛋白,并获得了高效多抗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范清宇	第四军医大学唐都医院骨科	248	1657	18.0	27.0
2	张勇	第四军医大学唐都医院骨科	126	711	13.0	19.0
3	陈苏民	第四军医大学生物化学教研室	100	695	11.0	23.0
4	杨彤涛	第四军医大学唐都医院骨科	65	330	9.0	13.0
5	高杰	第四军医大学唐都医院骨科	39	166	7.0	11.0
6	杨辉	第四军医大学生物化学教研室	14	45	4.0	6.0
7	刘继中	第四军医大学西京医院骨科	36	331	9.0	17.0
8	马保安	第四军医大学唐都医院骨科	178	969	13.0	18.0