人cubilin蛋白功能片段原核表达系统的建立

• 作者: 丁涵露 何娅妮 张建国 李开龙 李新伦 杨聚荣 林静 梁海君
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: cubilin pGEX-4T-1 融合蛋白 白蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1016-1018
• 页数: 3页
• 分类号: Q51|Q591.2|Q75
• 字数: 2553字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.10.006

摘要

目的构建编码白蛋白吞饮受体人cubilin(hcubilin)蛋白配体结合域CUB7-8基因片段的原核表达载体,诱导表达并鉴定表达产物.方法重组DNA技术构建原核表达载体pGEX-hCUB7-8,IPTG诱导表达,SDS-PAGE与免疫印迹法鉴定表达产物,Pull down实验验证融合蛋白是否与白蛋白结合.结果双酶切和测序鉴定表明CUB7-8片段插入正确,诱导表达后获得分子量为52×103的融合蛋白,该融合蛋白可以被抗GST抗体识别,并且可以和白蛋白结合.结论CUB7-8基因片段编码的蛋白质能在原核细胞中正确表达,并且可以和白蛋白结合,这为进一步研究该功能域的结构与功能奠定了基础.