难测序噬菌体基因组PaP1的大片段克隆及测序

• 作者: 丛延广 李明 申晓冬 胡福泉 谭银玲 饶贤才
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大片段克隆 噬菌体 基因组测序
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 539-542
• 页数: 4页
• 分类号: Q75|Q785|Q939.48
• 字数: 3989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.06.014

摘要

目的采用大片段克隆策略对难测序铜绿假单胞菌噬菌体PaP1基因组进行克隆及测序.方法用限制性内切酶AatⅡ将噬菌体PaP1基因组DNA切成几个大片段,分别进行末端修饰后与线性化的大片段克隆载体pYLTAC7连接,将连接产物电转化感受态细胞,筛选阳性克隆进行测序.结果 AatⅡ将PaP1基因组切成8个片段,通过大片段克隆共获得3个阳性克隆,测出插入片段大小分别为9 805、8 335 bp和3 465 bp,使该难测序基因组的测出量达到47 757 bp.结论大片段克隆策略能够克服鸟枪法测序的不足,将有望获得噬菌体PaP1的全基因组序列.