青钱柳ISSR-PCR反应体系的优化

• 作者: 李钧敏 谈探 金则新
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 青钱柳 ISSR 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2006,（24）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 6450-6451
• 页数: 2页
• 分类号: Q94-336
• 字数: 2321字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2006.24.022

摘要

采用改进的SDS法提取青钱柳基因组DNA,测试青钱柳ISSR扩增的最适退火温度,并采用单因素试验,测试了模板DNA、Mg2+、dNTP、BSA、引物\Taq酶6个因素对青钱柳ISSR扩增的影响.结果表明:合适的退火温度为56.3℃;适宜的扩增体系为:10μlPCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液浓度为(10mmol/L Tris·HCl,pH值9.0,浓度为50mmol/L KCl,0.1% Triton X-100),12 ng模板DNA,浓度为1.5mmol/LMgCl2,浓度为1.0mmol/L 4×dNTP,1mg/ml BSA,15 pmol引物,0.75 UTaq酶.