猪水肿毒素A亚基基因表达产物的生物学特性及抗体检测ELISA方法的建立

• 作者: 何华 何启盖 刘国平 卢顺 吴斌 张建民 赵战勤 金梅林 陈焕春
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪水肿病 猪水肿毒素 生物学特性 ELISA
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 378-382
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 5360字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.03.003

摘要

根据TMpred生物学软件对SLT-Ⅱe A亚基的蛋白质结构分析结果,表达了猪水肿毒素(SLT-Ⅱe)A亚基.SDS-PAGE和Western blot分析表明,表达产物以可溶形式存在,易于纯化且具有良好免疫学活性.生物学毒性试验表明,表达产物不能致死小白鼠,也不具有Vero细胞毒性.体外细胞毒性中和试验表明,表达产物的兔抗血清能中和天然SLT-Ⅱe(中和度90.4%).在小鼠免疫保护力试验中,表达产物作为免疫原不能提供任何保护力.以表达产物为抗原建立检测SLT-Ⅱe抗体的间接ELISA方法,结果该方法对猪萎缩性鼻炎等9种常见细菌性疾病阳性血清的检测均为阴性,能特异性检测到人工感染猪水肿毒素8 d仔猪的血清抗体IgG,对临床送检的1 083份猪血清的检测阳性率为20.9%.