Trichoderma reesei纤维素水解酶的糖苷合成性质

• 作者: 余多慰 张玢
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 化学
• 关键词: Trichoderma reesei 纤维素酶 酶活 糖苷合成 可逆反应
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 69-76
• 页数: 8页
• 分类号: O657.3|Q55
• 字数: 7333字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2007.02.015

摘要

通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(从(Trichoderma reesei天然纤维素水解酶中分离纯化得到了一种相对分子质量约为65 000的蛋白组分.分别以pNP-Glu、pNP-Gal、oNP-Gal和Avicel作为底物,均检出该组分的水解活性.此外该酶对CMC-Na有可被测出的弱活性.以pNP-Glu为底物,45℃时,其水解酶性质的米氏常数Km=3.04 mg/mL,Vmax=3.77 μmol/min.用DNS法和对硝基苯酚法(仅对含有对硝基酚结构的底物pNP-Glu、pNP-Gal和oNP-Gal)分别检测了在180 min反应时段内产物还原糖和对硝基苯酚的含量变化,结果显示在封闭的反应体系中有明显的可逆反应存在,并出现了周期性振荡的特征,有糖苷合成活性的表现,水解产生还原糖和对硝基苯酚的量,呈现出分别为25.43±8.34 min和36.25±2.50 min的含量增减振荡周期.与此同时,为了证实该酶糖苷合成活性的存在,以葡萄糖作为底物与酶反应,得到了7.00±4.83 min的葡萄糖含量周期性波状振荡结果.对底物为pNP-Glu反应15 min后的产物作乙酰化处理GC/MS分析,结果产物中有含二糖结构的产类型,揭示了这个水解酶的糖苷合成的特点.这是首次从Trichoderma reesei纤维素水解酶中分离得到了具有糖苷合成活性的酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余多慰	南京师范大学生命科学学院	42	239	9.0	12.0
2	张玢	南京师范大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0