HSPb1真核表达载体的构建及其在乳腺癌细胞中表达的研究

• 作者: 冯进波 孙靖中 时鹏 王明明
• 来源期刊: 中国现代普通外科进展
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 热休克蛋白质类 基因表达 基因重组 克隆,分子
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 467-470
• 页数: 4页
• 分类号: R737.9
• 字数: 2644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9905.2007.06.003

摘要

目的:构建重组人HSPb1真核表达载体质粒,为研究HSPbl与乳腺癌发生和化疗耐药的关系做准备.方法:从人乳腺癌细胞MCF-7中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成cDNA.设计引物调取目的 基因片段,与T载体连接后转化大肠埃希菌DH-5 α,筛选菌落并抽提质粒.测序正确后双酶切克隆进入真核表达载体pcDNA3.1中,得到重组质粒pcDNA3.1-HSPbl.用pcDNA3.1-HSPb1转染人乳腺癌细胞MDA-MA-231,RT-PCR法和Western blot法鉴定重组质粒在其中的表达.结果:经酶切证实重组质粒pcDNA3.1-HSPb1含有目的基因HSPb1.RT-PCR和Western blot检测表明,mRNA和蛋白水平,转染细胞HSPb1的表达均明显增强.结论:pcDNA3.1-HSPb1真核表达载体构建成功,它在乳腺癌细胞中可高表达目的基因,为进一步研究HSPb1在乳腺癌发生及化疗利药中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙靖中	山东大学齐鲁医院乳腺外科	65	592	12.0	21.0
2	冯进波	山东大学齐鲁医院心血管病中心实验室	33	185	8.0	11.0
3	王明明	山东省立医院普外科	2	1	1.0	1.0
4	时鹏	山东省立医院普外科	1	1	1.0	1.0