实时荧光定量PCR检测人类EZH2基因方法的建立

• 作者: 周志明 李一荣 王琳 胡丽华 陈凤花
• 来源期刊: 临床血液学杂志（输血与检验版）
• 学科: 生物学
• 关键词: EZH2基因 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 243-246
• 页数: 4页
• 分类号: Q343.1
• 字数: 3696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-2806-B.2007.06.001

摘要

目的:建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测人类EZH2基因的方法.方法:将EZH2 RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM-T后,经测序鉴定正确后,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测EZH2,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性.结果:该法检测的最低拷贝数为10,线性范围为101～108拷贝,相关系数r为-1.00,104copies/μl标本的批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.0%和2.7%.熔解曲线分析显示单一的峰,熔解温度(Tm)为(83.42±0.13)℃.结论:实时荧光定量PCR方法检测EZH2基因,具有高敏感性、高特异性和高精确性等优点,可作为进一步研究EZH2的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡丽华	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	219	1037	13.0	23.0
2	王琳	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	299	2005	21.0	35.0
3	李一荣	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	53	158	6.0	8.0
4	陈凤花	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	43	268	5.0	15.0
5	周志明	华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科	13	93	5.0	9.0