猪带绦虫dUTPase基因真核载体的构建及其在BHK细胞中的表达

• 作者: 乔军 张艳 才学鹏 景志忠 王笑笑 骆学农
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪带绦虫 六钩蚴 dUTPase 重组质粒 转染
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: S852.734|Q786
• 字数: 2381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2007.06.003

摘要

采用PCR技术从重组克隆载体pGEM-dUTPase中扩增出猪带绦虫六钩蚴dUTPase基因,与表达载体pGFP-C1相连接,构建重组表达质粒pGFP-C1-dUTPase,转化大肠埃希菌DH5α,经测序证实,基因序列完全正确.用脂质体法转染BHK细胞,采用荧光显微镜实时观察和RT-PCR技术确定目的蛋白的表达情况.结果表明,在转染重组质粒48 h后能观察到绿色荧光,表明在BHK细胞中成功地表达了猪带绦虫dUTPase与pGFP-C1的融合蛋白,为下一步重组dUTPase酶活性的研究奠定了基础.