新型低抗原性葡激酶的构建、表达及功能分析

• 作者: 刘深 吴琛 徐东刚 徐涛 王嘉玺 王圆圆 王旻 邹民吉
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡激酶 抗原性 突变 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 118-121
• 页数: 4页
• 分类号: Q556.9
• 字数: 3357字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2007.02.005

摘要

目的:降低野生型葡激酶(wild-type staphylokinase,wt-SAK)的抗原性,获得新型溶栓剂.方法:利用生物信息学分析野生型SAK抗原表位,将其分子内主要的抗原决定簇编码序列定点突变为丙氨酸密码子,将其N端抗原性较强的前10位氨基酸缺失.经过筛选从系列突变体中得到突变体NSAKV.结果:生物信息学分析突变后分子抗原性,结果表明其主要抗原表位消失.该突变体(NSAKV)与原核表达载体pET17b重组后,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导获得高效表达,NSAKV占全菌总蛋白的40%～50%,以可溶性形式存在.经进一步纯化,纯度达98%以上,分子量与理论值相符.比活性2.616×104 AU/mg.经ELISA法和溶圈法测定,NSAKV与wt-SAK制备的免抗wt-SAK抗血清的免疫反应性显著降低,经抗血清温育后wt-SAK活性下降程度远高于NSAKV.结论:突变体(NSAKV)保持了野生型SAK的活性,同时抗原性下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王嘉玺	军事医学科学院基础医学研究所	57	335	9.0	16.0
2	邹民吉	军事医学科学院基础医学研究所	39	238	6.0	14.0
3	徐东刚	军事医学科学院基础医学研究所	75	421	10.0	17.0
4	吴琛	军事医学科学院基础医学研究所	3	31	2.0	3.0
5	刘深	军事医学科学院基础医学研究所	8	147	3.0	8.0
6	徐涛	军事医学科学院基础医学研究所	13	151	3.0	12.0
7	王旻	军事医学科学院基础医学研究所	7	12	2.0	3.0
8	王圆圆	军事医学科学院基础医学研究所	2	6	1.0	2.0