人角质细胞生长因子2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 余德荣 游力 王郡甫 许晓群 高春义
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人角质细胞生长因子2 克隆 可溶性表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 224-226
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2966字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.02.014

摘要

目的:构建人角质细胞生长因子2(hKGF2)基因的高效原核表达载体pET-30a(+)-hKGF2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达.方法:从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出去除了信号肽部分的hKGF2基因,克隆到pMD18-T载体,经DNA序列分析后与pET-30a(+)表达载体连接,在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达6×His-hKGF2,用SDS-PAGE及Western印迹鉴定表达蛋白.结果:构建了表达载体pET-30a(+)-hKGF2,经IPTG诱导后,表达的重组蛋白理论相对分子质量约为23 000,约占菌体总蛋白的20%.结论:6×His-hKGF2蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中为可溶性高效表达,为获得高纯度、高活性的产物,以及进一步的大规模生产和应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高春义	山东省医学科学院基础医学研究所	14	102	5.0	10.0
2	许晓群	山东省医学科学院基础医学研究所	71	519	12.0	19.0
3	王郡甫	山东省医学科学院基础医学研究所	31	214	8.0	13.0
4	余德荣	山东省医学科学院基础医学研究所	3	27	3.0	3.0
5	游力		1	3	1.0	1.0