人隔蛋白7的真核表达载体的构建及表达

• 作者: 康春生 张志勇 浦佩玉 王广秀 裘明哲 贾志凡 黄强
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人隔蛋白7 质粒构建 胶质瘤细胞 细胞周期
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 401-405
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3831字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2007.05.006

摘要

目的 构建人隔蛋白7(SEPT7,hCDC10/SEPT7)的表达载体并对U251人脑恶性胶质瘤细胞系进行转染且检测其表达.方法 RT-PCR方法扩增SEPT7 cDNA片段,并将扩增的片段插入pCDNA3真核表达载体,构建成含SEPT7 cDNA的重组载体pCDNA3/SEPT7,以脂质体介导该质粒转染人脑恶性胶质瘤细胞系U251,应用RT-PCR和免疫荧光染色鉴定转染细胞中hCDC10/SEPT7的表达.用流式细胞术对转染前后的U251细胞进行细胞周期分析.结果 成功构建含SEPT7 cDNA的重组载体pCDNA3/SEPT7,并使其稳定转染U251细胞,在转染的细胞中,证实有SEPT7 mRNA表达上调.细胞周期检测结果G0/G1期细胞增多,SPF降低.结论 成功构建SEPT7表达载体,并在人脑恶性胶质瘤细胞系获得表达,延迟细胞周期进展.