拟南芥Alpha-dioxygenase 2原核表达、纯化及亚细胞定位预测

• 作者: 张小梅 张美祥 罗龙海 范三红 郭蔼光 闫晓华
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: α-DOX2 表达 稀有密码子 亲和纯化 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 816-820
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.05.017

摘要

将拟南芥α-dioxygenase 2(DOX2)基因编码区克隆到原核表达载体pGEX-5X-1获得重组表达载体pGEX-DOX2,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)pLysS和BL21(DE3)-RIPL codon+菌株中进行诱导表达.SDS-PAGE和Westernblot结果表明,融合蛋白在BL21(DE3)-RIPL codon+中得到了高效表达,融合蛋白表观分子量约为98 kD,占菌体总蛋白的38%.经GST亲和柱层析进一步纯化获得了可溶性重组蛋白;愈创木酚法测试表明,可溶性重组蛋白不具有过氧化物酶活性.利用Rare codon Caltor进行的密码子偏爱性分析显示,该基因读码框中含有88个大肠杆菌稀有密码子,占总密码子(631个)的14%;Signal P、CELLO v.2.5、PSLpred和Softberry-ProtComp Version 6.1等软件分析结果显示,拟南芥DOX2可能定位于细胞质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭蔼光	西北农林科技大学陕西省农业分子生物学重点实验室	110	1264	19.0	27.0