应用亲合层析结合液相色谱串联质谱法发现结核分枝杆菌H37Rv的新的糖蛋白

• 作者: 刘振桐 姜妙娜 贾玉杰
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 化学
• 关键词: 液相色谱串联质谱 结核分枝杆菌 刀豆素A亲和层析 铜-锌超氧化物歧化酶
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 326-329
• 页数: 4页
• 分类号: O657.72
• 字数: 3082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2007.04.007

摘要

目的:应用刀豆素A(ConA)亲合层析结合液相色谱串联质谱法(HPLC-MS)发现结核分枝杆菌H37Rv的新的糖蛋白.方法:收集生长2周的结核菌培养液,经过滤浓缩得到培养滤液蛋白(culture filtrate protein, CFP).应用ConA亲合层析法纯化CFP中的糖蛋白,经SDS-PAGE电泳结合考马斯亮蓝染色后,对蛋白条带进行胰蛋白酶消化.应用HPLC-MS检测消化后的糖肽结构并与结核菌H37Rv蛋白质数据库进行比对,寻找新的糖蛋白.结果:CFP经ConA亲合层析纯化后的电泳结果显示有数条蛋白条带出现,经筛选相对分子质量26×103蛋白最可能为糖蛋白.酶切消化该蛋白得到的多肽在HPLC-MS上保留时间26.24 min处显示有多肽色谱峰,其对应的一级MS图提示该多肽总质量为1 467原子质量单位(AMU),二级MS图显示为多个质荷比(m/z)逐级减少为54(一个己糖的分子质量单位为162 AMU)的多肽,提示有己糖丢失.同时,MS分析肽链氨基酸序列并证实蛋白的糖基化存在.与结核菌H37Rv蛋白质数据库比对结果提示,结核菌分泌的26×103蛋白为一新的糖蛋白,即铜-锌超氧化物歧化酶.结论:应用ConA亲合层析结合HPLC-MS发现了一个新的结核分枝杆菌糖蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜妙娜	大连医科大学病理生理教研室	90	553	12.0	16.0
2	贾玉杰	大连医科大学病理生理教研室	112	765	13.0	18.0
3	刘振桐	大连医科大学病理生理教研室	15	119	4.0	10.0