结核分枝杆菌H37Rv蛋白Rv2364c的表达纯化与生物信息学分析

• 作者: 付陈增 徐宛玲
• 来源期刊: 河南科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌H37Rv Rv2364c 转染 生物信息分析
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 22-24
• 页数: 3页
• 分类号: Q811.4|R378.91+1
• 字数: 2203字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2017.01.007

摘要

目的 在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌H37Rv的Rv2364c蛋白,为研发抗结核分枝杆菌的药物提供材料.方法 PCR扩增目的基因Rv2364c.将PCR产物克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组原核表达质粒pET-28a-Rv2364c.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白.表达产物经镍亲和层析柱纯化,并对该蛋白做生物信息分析.结果 双酶切和基因测序结果表明,成功构建了含有Rv2364c基因的重组表达质粒.SDS-PAGE结果显示,目的蛋白在大肠杆菌中得到了大量表达,经镍亲和层析柱纯化后目的蛋白的纯度达到了90%以上.生物信息学分析表明Rv2364c为稳定酸性蛋白,α-螺旋和无规卷曲为其主要二级结构元件,主要结构域类型有Era结构域和KH结构域两种.结论 成功表达和纯化了Rv2364c蛋白,并利用生物信息学方法初步预测其结构域等,为进一步研究Rv2364c在结核病发生发展中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐宛玲		54	194	8.0	9.0
2	付陈增		14	10	2.0	3.0