结核分枝杆菌Rv2460 c基因的克隆,表达及编码产物的免疫特性分析

• 作者: 卢楠 康月茜 张春燕 李岱容 杨春 穆柳青
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 关键词: 结核分枝杆菌 重组蛋白ClpP2 免疫原性
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 790-794
• 页数: 5页
• 字数: 4280字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.06.015

摘要

目的：：对结核分枝杆菌Rv2460c基因(编码ClpP2蛋白)进行克隆,表达,并评价其编码产物的免疫原性。方法：扩增结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)H37Rv 的Rv2460c基因,构建重组质粒pET32a(+)-ClpP2,用IPTG诱导表达,利用亲和层析法进行纯化。用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白ClpP2的表达和鉴定。用生物信息学对Mtb ClpP2的免疫原性分析和表位预测。酶联免疫吸附法( ELISA)测定兔和TB病人血清anti-ClpP2滴度。结果：重组ClpP2蛋白酶在大肠杆菌中以包涵体形式表达,经 bandscan 软件分析纯化蛋白的纯度为93%。生物信息学分析Mtb ClpP2蛋白具有多个优势B细胞表位和T细胞表位。 ELISA法测定兔抗血清效价为1∶64000；检测肺结核病人血清中anti-ClpP2抗体水平高于健康对照人群。结论：成功纯化了重组蛋白ClpP2和制备了特异性兔抗ClpP2多克隆抗体,实验和信息学均表明Mtb ClpP2蛋白酶有较强的免疫原性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨春	重庆医科大学病原生物学教研室与肿瘤研究中心	83	257	8.0	11.0
2	李岱容	重庆医科大学病原生物学教研室与肿瘤研究中心	29	94	6.0	8.0
3	卢楠	重庆医科大学病原生物学教研室与肿瘤研究中心	7	2	1.0	1.0
4	康月茜	重庆医科大学病原生物学教研室与肿瘤研究中心	3	1	1.0	1.0
5	张春燕	重庆医科大学病原生物学教研室与肿瘤研究中心	6	3	1.0	1.0
6	穆柳青	重庆医科大学病原生物学教研室与肿瘤研究中心	6	3	1.0	1.0