洋葱假单胞菌G63脂肪酶基因及其伴侣基因的克隆和同源高效表达

• 作者: 杨江科 郭道义 闫云君
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 脂肪酶基因 克隆 高效表达 P.cepacia G63
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 175-179
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 字数: 4701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2007.02.013

摘要

从油污土壤中筛选到一株脂肪酶活性较高的洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia)G63.运用PCR的方法从该菌株中克隆了脂肪酶基因(lipA)及其伴侣基因(lipB).该脂肪酶基因开放式阅读框(ORF)为1092bp,编码364个氨基酸残基.经KpnⅠ/HindⅢ酶切,将其克隆到广泛宿主质粒pBBR1Tp载体上,构建成质粒pBBR1-lipAB.通过三亲杂交,在辅助质粒pRK2013的帮助下,转入原宿主菌P.cepacia G63中,构建成lipA基因同源高效表达的基因工程菌.该菌株在连续转接5次,培养45h后质粒保持率为82.6%,适用于规模化发酵生产.摇床发酵表明,工程菌在60h时酶活达到150.63 U/mL,较原始菌株提高3.6倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨江科	华中科技大学生命科学技术学院	45	812	18.0	26.0
2	闫云君	华中科技大学生命科学技术学院	116	1519	22.0	31.0
3	郭道义	华中科技大学生命科学技术学院	1	9	1.0	1.0