伪狂犬病病毒gE基因的表达及gE蛋白单克隆抗体的制备

• 作者: 刘永刚 刘狄萩 吴国军 张琦 李成君 王淑杰 石文达 蔡雪辉 马平
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病病毒 gE蛋白 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 679-683
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1|Q813.2
• 字数: 4642字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.08.010

摘要

以猪伪狂犬病病毒(PRV)Min-A株pMD-gE质粒为模板,利用所合成的特异性引物进行PCR扩增,获得了1 000 bp的DNA片段,并将其克隆至表达载体pET-30a中,转化到大肠杆菌中进行了原核表达,对表达产物进行了抗原性分析;在此基础上,用纯化的gE蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选和鉴定了分泌抗gE蛋白单抗的杂交瘤细胞株.结果显示,原核表达的gE蛋白具有良好的抗原性,其分子质量为46 ku.筛选获得3株分泌抗gE蛋白单抗的杂交瘤细胞株,Western-blot和间接免疫荧光试验证实,所获得的3株单抗具有良好的特异免疫反应原性.3株单抗均为IgG1亚类,且轻链均为κ链.