嗜肺军团菌主要免疫原基因真核表达质粒的构建与表达

• 作者: 刘德松 刘明杰 张雷 杨志伟 陈建平
• 来源期刊: 四川大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜肺军团菌 主要免疫原基因 转染 体外表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 198-201
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3407字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2007.02.005

摘要

目的 构建嗜肺军团菌主要免疫原基因的真核表达重组质粒pcDNA3.1-ip,并观察其在真核细胞中的表达.方法 以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR扩增获得嗜肺军团菌ip基因,将其定向插入载体pcDNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-ip.经限制性核酸内切酶HindⅢ和BamHⅠ酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后,用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-ip转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法和Western blot分别鉴定pcDNA3.1-ip的瞬时和稳定表达.结果 成功构建了嗜肺军团菌ip基因的真核表达重组质粒.在细胞膜与细胞内观察到较强的绿色荧光,表明pcDNA3.1-ip成功转入NIH3T3细胞,并在NIH3T3细胞中得到了瞬时表达;用嗜肺军团菌兔血清抗体检测pcDNA3.1-ip稳定转染的NIH3T3细胞,在相对分子质量为29×103处检测到阳性杂交信号,表明pcDNA3.1-ip在细胞内可稳定表达IP蛋白.结论 本研究构建的嗜肺军团菌主要免疫原基因真核表达质粒pcDNA3.1-ip能够成功表达IP蛋白,表达的蛋白具有良好的免疫原性与免疫反应性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张雷	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	27	78	5.0	7.0
2	陈建平	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	78	217	7.0	9.0
3	刘德松	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	5	15	2.0	3.0
4	刘明杰	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	8	38	3.0	6.0
5	杨志伟	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	11	30	4.0	5.0