嗜肺军团菌mip基因真核表达重组质粒构建与表达

• 作者: 张雷 李虹 杨春蕾 王涛 陈建平 陶大昌
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜肺军团菌 mip基因 转染 体外表达
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 773-775
• 页数: 3页
• 分类号: R378
• 字数: 2587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2005.06.004

摘要

目的构建嗜肺军团菌mip基因的真核表达重组质粒pcDNA3.1-mip,并研究其在细胞中的表达.方法 PCR扩增嗜肺军团菌mip基因,导入载体pcDNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-mip.用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1- mip转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法和Western-blot分别鉴定pcDNA3.1-mip的瞬时表达产物和稳定表达产物.结果在细胞膜和细胞内观察到较强的绿色荧光,表明pcDNA3.1-mip成功转入NIH3T3细胞,并在细胞膜和细胞内获得短暂表达;用嗜肺军团菌兔血清抗体检测pcDNA3.1-mip稳定转染的NIH3T3细胞,在相对分子质量24×103处检测到阳性杂交信号,表明pcDNA3.1-mip在细胞内表达出Mip蛋白.空质粒pcDNA3.1(+)转染的NIH3T3细胞未检测到绿色荧光和杂交信号.结论成功构建mip基因真核表达重组质粒,并在NIH3T3细胞中表达出相对分子质量为24×103的Mip蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张雷	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	27	78	5.0	7.0
2	陈建平	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	78	217	7.0	9.0
3	王涛	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	151	897	15.0	23.0
4	陶大昌		24	204	8.0	13.0