嗜肺军团菌mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体的构建及表达

• 作者: 何金蕾 余泽英 张俊荣 彭冉 李娜丽莎 陈建平 陈莹 陈达丽 龚艳菊
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 嗜肺军团菌 优势抗原表位 mip基因 flaA基因 融合表达
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-6
• 语种: 中文

摘要

目的 选取嗜肺军团菌mip和flaA优势抗原表位基因,构建mip/ flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体,并在原核系统中表达,为后续制备嗜肺军团菌蛋白疫苗提供初步的实验基础.方法 运用生物信息学方法对Mip和FlaA蛋白的二级结构和表面特性如理化性质、亲水性、可塑性、抗原指数以及胞外区等方面进行分析,选择其活性表位可能存在的区域为优势抗原表位区.通过PCR扩增和T4连接酶构建pET-mip、pET-flaA和pET-mip/ flaA优势抗原表位基因融合表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达.结果 Mip和FlaA都存在多个潜在的抗原表位位点,选取其优势抗原表位区域进行克隆和表达获得成功,并成功表达了mip/ flaA二联优势抗原表位融合蛋白.结论 DNA Star软件和Expasy在线蛋白分析系统能够成功预测嗜肺军团菌Mip和FlaA抗原的表位;选取其优势抗原表位成功构建了pET-mip/ flaA二联原核表达载体,并高效表达.