嗜肺军团菌flaA基因的克隆及原核融合表达

• 作者: 刘明杰 张莉 张雷 王涛 田玉 陈建平
• 来源期刊: 四川大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜肺军团菌 鞭毛亚单位基因(flaA) 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 194-197
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3468字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2007.02.004

摘要

目的 构建嗜肺军团菌鞭毛亚单位蛋白基因(flaA)的融合表达载体,并在原核系统表达,为进一步研究鞭毛亚单位蛋白的致病作用和免疫保护性提供前提条件.方法 以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR扩增获得嗜肺军团菌flaA基因,与带有硫氧还蛋白基因(Trx)的高效原核表达质粒pET32a(+)定向重组,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后,以IPTG诱导表达Trx-flaA融合蛋白, 用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定.结果 限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,扩增出了嗜肺军团菌1435 bp的flaA基因,成功构建了重组质粒pET-flaA,SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒pET-flaA在大肠杆菌中得到了高效融合表达.结论 成功构建嗜肺军团菌flaA基因重组质粒,并在原核系统中得到了高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莉	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	183	1016	13.0	26.0
2	张雷	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	27	78	5.0	7.0
3	陈建平	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	78	217	7.0	9.0
4	王涛	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	151	897	15.0	23.0
5	田玉	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	20	69	5.0	6.0
6	刘明杰	四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室	8	38	3.0	6.0